微生物菌种提纯复壮的几个主要方法
所谓纯菌种分离是指采用无菌操作技术，将食用菌的菌种从混杂的微生物群中单独地分离出来。常用的分离方法有孢子分离法、组织分离法、基内菌丝分离法和土中菌丝分离法。
倾注平板法 首先把微生物悬液通过一系列稀释，取一定量的稀释液与熔化好的保持在40~50°左右的营养琼脂培养基充分混合，然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中，待凝固之后，把这平板倒置在恒箱中培养。
菌种分离主要在培养皿上进行，常用的方法是稀释法和划线法。
菌种的复壮方法包括:()
甘油管保藏的菌种可以通过以下步骤复壮： 将无菌操作台灭菌30min后，用75％酒精棉球消毒包括手在内的所有物品。 使用灭菌接种环扣取甘油管中的冷冻菌块，放入3mlLB液体培养基中。 在37℃、150rpm的条件下过夜培养。
栽培种如果保存时间太长，是没有办法复壮的。如果菌丝体已经出现老化现象，最好不要再使用。
常用的分离方法有孢子分离法、组织分离法、基内菌丝分离法和土中菌丝分离法。在自然条件下，菌种的复壮，只有靠产生新一代才能实现，经有性繁殖所产生的孢子，是食用菌生活史的起点，具有丰富的遗传特性。
菌种衰退的原因是什么?如何对衰退的菌种进行复壮
1、(6）利用不同类型的细胞进行移种传代。 (7）采用有效的菌种保藏方法。
2、根据查询百度文库得知，菌种退化的原因如下：基因突变：由于基因突变引起的菌种退化是非常常见的。基因突变是指基因序列变化的突发事件，它可能导致蛋白质表达的变化、细胞功能的失调，从而对菌株的特性和功效产生不可逆的影响。
3、③营养不良。长期使用单一种类和配方、成分基本相同的培养基，造成营养不能达到生理要求，菌丝生长活力由强变弱，衰老退化。④环境欠佳。菌丝生长发育期环境不良，杂菌污染，也会加速菌种退化。
4、自发突变引起衰退；衰退菌种菌丝生长凌乱，产生角变，子实体性状改变，产量质量降低。
5、菌种衰退：生产菌株生产性状的劣化或遗传研究菌株遗传标记的丢失称为菌种衰退。 原因： 自发突变 菌种退化的主要原因是有关基因的负突变。
菌种如何复壮呢?
1、栽培种如果保存时间太长，是没有办法复壮的。如果菌丝体已经出现老化现象，最好不要再使用。
2、根本原因在于基因自发突变，采用狭义复壮（分离纯化、活体接种等）和广义复壮。合理的育种；选用合适的培养基；创造良好的培养条件；控制传代次数；用不同类型的细胞进行接种传代；采用有效的菌种保藏方法。
3、通过纯种分离法，设法把这种细胞挑选出来即可达到复壮的效果。
4、常用的分离方法有孢子分离法、组织分离法、基内菌丝分离法和土中菌丝分离法。在自然条件下，菌种的复壮，只有靠产生新一代才能实现，经有性繁殖所产生的孢子，是食用菌生活史的起点，具有丰富的遗传特性。
5、将衰退菌种进行一定的处理(如药物，低温、高温等)，往往可以起到淘汰已衰退个体而达到复壮的目的。
菌种复壮名词解释
菌种复壮是指对濒临死亡的菌种进行恢复和改善，使其重新具备生产能力和遗传稳定性的一种过程。
对菌种进行纯化也叫“分纯”或“复壮”。即：对菌种进行分离、纯化、恢复其最佳发酵能力。方法比较简单，就是先进行液体培养，再用稀释法分离成单菌落。
菌种复壮 ：菌种经常进行分离纯化发酵验证工作。狭义复壮：是消极措施，从以退化的菌种筛未退化的单菌。广义复壮：是积极措施，在未退化前，不断经行分离纯化工作，以期在群体中获得性能更好的这次菌株。
复壮——其中一种是从退化菌种的群体中找出少数尚未退化的个体，以达到恢复菌种的原有典型性状。另一种是在菌种的生产性能尚未退化前就经常而有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作，以达到菌种的生产性能逐步有所提高。
重新成为纯种群体的措施。狭义的复壮是一消极措施，一般指对已衰退的菌种进行复壮；广义的复壮是一积极的措施，即在菌种的生产性状未衰退前就不断进行纯种分离和生产性状测定，以在群体中获得生产性状更好的自发突变株。
让他们在特定培养基上成长，把生长快，活性高的细胞挑出来，形成一个新的“菌种”集合体，也就是所谓的单细胞克隆吧。菌种复壮是发酵生产过程最常用的一个技术，也是靠微生物吃饭的企业赚钱的最基本方法。
